Coombsov test

Što je Coombsov test?

Coombsov test koristi se za otkrivanje antitijela protiv crvenih krvnih zrnaca (eritrocita). Za određivanje antitijela koristi se takozvani Coombsov serum koji se dobiva iz seruma kunića i osjetljiv je na ljudska antitijela.
Test se koristi ako se sumnja na hemolitičku anemiju, nekompatibilnost rezusa ili neposredno prije transfuzije krvi. Hemolitička anemija je oblik anemije, a rezusna nespojivost opisuje nespojivost krvne grupe.
Postoje dvije različite vrste Coombsova testa, izravni i neizravni test razlikuju se u pogledu indikacije i izvršenja.

Razlozi Coombsovog testa

Izravni Coombsov test koristi se ako se sumnja na hemolitičku anemiju. Hemolitička anemija opisuje anemiju kod koje se krvne stanice prijevremeno razgrade zbog oštećenja.
Kod autoimunih bolesti poput sistemskog eritematoznog lupusa, reumatoidnog artritisa ili kronične limfocitne leukemije stvaraju se antitijela koja su usmjerena protiv vlastitih krvnih stanica (tzv. Eritrociti). Vezanje antitijela dovodi do ranog raspada krvnih stanica ili do zgrušavanja krvnih stanica u žilama. Oboje dovodi do pada vrijednosti hemoglobina.

Još jedna indikacija za izravni Coombsov test je bolest hemolyticus neonatorum, ovdje se antitijela protiv rezusnog faktora stvaraju u tijelu majke koja ima rezus. Ako je nerođeno dijete rezus-pozitivno, antitijela iz majke mogu ući u cirkulaciju fetusa i tamo pokrenuti povećani raspad krvnih stanica. Novorođenčad se ističe teškom anemijom i žuticom.

Coombsov test redovito se koristi u transfuzijskoj medicini. Koristi se za određivanje krvnih grupa prije transfuzije krvi (bedside test), u kojoj se mali uzorak krvi miješa s različitim serumima iz krvnih skupina A, B, AB i 0. Ako krv ostane tekuća, pacijentova krv kompatibilna je s odgovarajućom krvnom skupinom. Transfuzija se može provesti.

Neizravni Coombsov test također se može koristiti za traženje slobodnih antitijela u pacijentovom tijelu (test pretraživanja antitijela), npr. tijekom pregleda majke u pripremi za transfuziju onkoloških pacijenata ili ljudi koji su već primili transfuziju krvi.

Saznajte sve o ovoj temi ovdje: Rh netolerancija.

Priprema

U pripremi za Coombsov test prvo se pripremaju serumi s antitijelima na koja treba testirati. Pune se u različite epruvete ili se primjenjuju na testnim karticama.

U svakodnevnoj kliničkoj praksi, npr. uz bedside test već su pripremljene testne kartice koje se mogu odmah koristiti. Zatim se iz pacijenta uzima krv i priprema za test. Ovisno o vrsti Coombsova testa, potrebne su krvne stanice ili serum (tekući dio krvi) pacijenta.

Slijed

Ako se izvodi izravni Coombsov test, crvene krvne stanice se filtriraju iz pacijentove krvi. Treba provjeriti postoje li na njima antitijela tipa IgG, koja uzrokuju hemolitičku anemiju ili nekompatibilnost krvnih grupa u tijelu. Coombsov serum sadrži antitijela protiv humanih IgG antitijela. Smjesa se dugo zagrijava (inkubira). Ako na crvenim krvnim stanicama postoje antitijela, oni se zgrušavaju i test postaje pozitivan.

Neizravni Coombsov test sastoji se od dva dijela. Cilj je utvrditi antitijela koja su slobodna u krvi i nisu vezana za krvne stanice.
Ovaj put se tekući dio (serum) filtrira iz pacijentove krvi. Prvo, crvenim krvnim ćelijama se dodaju u serum za test. Ako u serumu postoje slobodna antitijela, ona će se vezati za crvena krvna zrnca. Ova reakcija nije vidljiva. Tek u drugom koraku, kao u izravnom Coombsovom testu, dodaje se i zagrijava Coombsov serum s antitijelima protiv humanih antitijela. I ovdje se rješenje skuplja ako je rezultat pozitivan.

Vrednovanje

Ako se antitijela kombiniraju s pogodnim Cooms serumom, antitijela u serumu (tekućem dijelu krvi) vežu se s pacijentovim antitijelima. Antitijela su u obliku slova Y, što znači da uvijek mogu vezati dva partnera za vezivanje i tako umrežiti crvene krvne stanice jedni s drugima. Stvara se velika akumulacija krvnih stanica. Ove nakupine postaju vidljive - krv se aglutinira (nakupina) i test je pozitivan.
Ako pacijent nema odgovarajuća antitijela, serum ostaje tekuć. Ne možete vidjeti nikakvu promjenu - test je negativan.

Koje su alternative?

Alternativa Coombsovom testu je imunološka ELISA metoda (enzimski imunosorbentni test), u kojoj su određena antitijela obilježena enzimom. Ovo antitijelo je dodano testnoj otopini. Ako obilježena antitijela reagiraju s antitijelima u ispitnoj otopini, vezani enzim se aktivira i stvara boju. Odgovarajuće epruvete mijenjaju boju - test je pozitivan.

Pored postupka ELISA, tu je i WESTERN mrlja koja se često koristi kao potvrdni test za pozitivnu ELISA analizu.